18. Article

Baktērijas DNS izdalīšana: 18.1. ievieto 220 μl lizēšanas bufera mikromēģenē; 18.2. pievieno 100 μl paraugu ekstrakta; 18.3. paraugu inkubē 95 °C temperatūrā 10 minūtes; 18.4. turpina parauga inkubēšanu uz ledus 5 minūtes; 18.5. pievieno 80 μl lizozīma koncentrāta; 18.6. inkubē paraugu 37 °C 30 minūtes; 18.7. pievieno 220 μl EasyDNA šķīduma A, invertē paraugu; 18.8. inkubē 65 °C 30 minūtes; 18.9. pievieno 100 μl EasyDNA šķīduma B, invertē paraugu, līdz veidojas viskozs šķīdums; 18.10. pievieno 500 μl hloroforma un labi sakrata; 18.11. centrifugē paraugu (15000 g) 20 minūtes +4 °C temperatūrā; 18.12. virsējo fāzi pārnes jaunā mikromēģenē; 18.13. pievieno 1 ml atdzesēta (-20 °C) 96% etanola; 18.14. centrifugē paraugu (15000 g) 20 minūtes +4 °C temperatūrā; 18.15. nolej šķidro fāzi; 18.16. pievieno 500 μl atdzesēta (-20 °C) 80% etanola; 18.17. centrifugē paraugu (15000 g) 20 minūtes +4 °C temperatūrā; 18.18. nolej šķidro fāzi; 18.19. žāvē nogulsnes istabas temperatūrā; 18.20. nogulsnes šķīdina 100 μl sterila destilēta ūdens; 18.21. inkubē paraugu istabas temperatūrā 20 minūtes; 18.22. pārvieto paraugu -20 °C temperatūrā turpmākai uzglabāšanai.
  1. g)) 20 minūtes +4 °C temperatūrā;
  2. g)) 20 minūtes +4 °C temperatūrā;
  3. g)) 20 minūtes +4 °C temperatūrā;
asjoint-stock