33. Article
Plati ievieto reāllaikā amplifikatorā, kas ieprogrammēts
atgriezeniskās transkripcijas un cDNS
amplifikācijas/fluorescences noteikšanai. Amplifikācijas apstākļi
ietver pirmo atgriezeniskās transkripcijas soli 25 minūtes 48 °C
temperatūrā, tad 10 minūšu 95 °C temperatūrā (karstā
iedarbināšana) un 40 ciklu pa 15 sekundēm 95 °C temperatūrā, 35
sekundes 55 °C temperatūrā un 30 sekunžu 72 °C temperatūrā (vai
40 ciklu pa 2 sekundēm 97 °C un 30 sekunžu 55 °C temperatūrā, ja
izmanto reaģentus un amplifikatoru, kas pieļauj ātru reakcijas
gaitu). Fluorescences datus iegūst 55 °C temperatūras soļa
beigās.
asjoint-stock