124. Article

Oksidējošo krāsvielu kvalitatīvu un puskvantitatīvu noteikšanu matu krāsās veic šādā kārtībā: 124.1. Analizējamo paraugu apstrādi veic šādi: 124.1.1. Noņem pirmos 2 vai 3 cm krēma, ko izspiež no tūbiņas. 124.1.2. Iepriekš ar slāpekli izskalotā centrifūgas mēģenē (atbilstoši šā pielikuma 123.3.apakšpunktam) liek 300 mg askorbīnskābes un 3 g krēma vai 3 g homogenizēta šķidruma. 124.1.3. Pa pilienam pievieno 25 % amonjaku, līdz pH ir 10. 124.1.4. Uzpilda līdz 10 ml ar 96 % etanolu (atbilstoši šā pielikuma 122.3.apakšpunktam). 124.1.5. Homogenizē slāpeklī (atbilstoši šā pielikuma 122.8.apakšpunktam), aiztaisa mēģeni un 10 minūtes centrifugē ar 4000 apgr./min. 124.1.6. Izmanto centrifugātu. 124.2. Hromatogrāfija: 124.2.1. Šķīdumu uznešana uz platēm: 124.2.1.1. Slāpeklī (atbilstoši šā pielikuma 122.8.apakšpunktam) uz hromatogrāfijas plates (atbilstoši šā pielikuma 123.1.3.apakšpunktam) deviņos punktos, kas atrodas apmēram 1,5 cm cits no cita uz līnijas, kura ir apmēram 1,5 cm no plates malas, klāj 1 µl katra iepriekšminētā standartšķīduma. 124.2.1.2. Standartšķīduma plankumus izvieto šādi: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 R P H PPD DAP PTD OPD OTD MPD MTD a-N 124.2.1.3. Aiz devītā standartšķīduma plankuma (MPD) klāj attiecīgi 2 µl kontrolšķīduma paraugu, ko iegūst saskaņā ar šī pielikuma 124.1.apakšpunktu. 124.2.1.4. Plati tur slāpeklī (atbilstoši šā pielikuma 122.8.apakšpunktam) līdz hromatogrāfiskās analīzes beigām. 124.2.2. Attīstīšana: 124.2.2.1. Liek plati kamerā, kas iepriekš izskalota ar slāpekli (atbilstoši šā pielikuma 122.8.apakšpunktam), piesātina ar vienu no četriem šķīdinātājiem (atbilstoši šā pielikuma 122.22.apakšpunktam) un attīsta istabas temperatūrā (20-25 °C) tumsā, līdz šķīdinātāja fronte ir pavirzījusies apmēram par 15 cm no starta līnijas. 124.2.2.2. Izņem plati un istabas temperatūrā žāvē slāpeklī (atbilstoši šā pielikuma 122.8.apakšpunktam). 124.2.3. Plati tūlīt apsmidzina ar vienu no četriem šķīdinātājiem, kas norādīti šā pielikuma 122.23.apakšpunktā. 124.2.4. Kvalitatīva noteikšana. Salīdzina parauga Rf vērtību un iegūto krāsu ar hromatografēto standartvielu Rf vērtību un krāsu. Šā pielikuma I tabulā ir Rf vērtību piemēri un krāsas katrai standartvielai atkarībā no izmantotā šķīdinātāja un indikatora. Šaubu gadījumā apstiprinājumu dažreiz var gūt ar standartpievienošanas metodi, pievienojot attiecīgās standartvielas šķīdumu parauga ekstraktam. 124.2.5. Puskvantitatīvais vērtējums. Vizuāli salīdzina visu šā pielikuma 124.2.4.apakšpunktā noteikto vielu plankumu intensitāti ar standartvielu attiecīgā diapazona koncentrācijām. Ja vienas vai vairāku paraugā atrasto vielu koncentrācija ir pārākumā, parauga ekstraktu atšķaida un mērījumu atkārto. I tabula Rf vērtības un krāsas, ko iegūst tūlīt pēc attīstīšanas Standartviela (122.20.) Attīstošie šķīdinātāji Attīstītāji Rf vērtības iegūtās krāsas (122.22.1.) (122.22.2.) (122.22.3.) (122.22.4.) diazotējošs reaģents (122.23.1.) Ērliha reaģents (122.23.2.) dimetilfenols (122.23.3.) AgNO3(122.23.4.) OPD 0,62 0,60 0,30 0,57 bāli brūns - - bāli brūns MPD 0,40 0,60 0,47 0,48 violeti brūns* dzeltens bāli brūns bāli brūns PPD 0,20 0,50 0,30 0,48 brūns spilgti sarkans* violets pelēks OTD 0,60 0,60 0,53 0,60 brūns* bāli oranžs bāli brūns pelēcīgi brūns MTD 0,40 0,67 0,45 0,60 sarkanīgi brūns* dzeltens brūns melns PTD 0,33 0,65 0,37 0,70 brūns oranžs violets* pelēks DAP 0,07 - 0 0,05 brūns* oranžs violets brūns H 0,50 0,35 0,80 0,20 - oranžs violets melns* a·N 0,90 0,80 0,90 0,75 oranži brūns - violets* melns 0,37 - 0,67 0,05 brūns ļoti bāli violets ļoti bāli brūns brūns* 0,50 0,37 0,80 0,17 oranžs* bāli violets ļoti bāli brūns bāli brūns Piezīmes.